研究級的分光光度計是利用物質分子對紫外可見光譜區的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析方法。這種分子吸收光譜產生于價電子能級的躍遷,它廣泛用于無機和有機物質的定性和定量分析。
研究級的分光光度計和人一樣,有也會出問題的時候,有時候會導致測量數據產生偏差,所以我們要定期對儀器進行檢測,使儀器一直都在穩定準確的測量范圍內。那么需要哪些測量呢?一般為以下幾種:
研究級的分光光度計的波長準確度和波長重復性的檢測:
用氧化鈥溶液的241.13、278.10、287.18、333.44、345.47、361.31、416.28、451.30、485.29、536.64和640.52nm的吸收值進行檢定。檢定時先制造4%氧化鈥的10%高氯酸溶液,將儀器波長設置為700~200nm規模,狹縫小于1nm,以空氣為空白,調度透光率為。取上述氧化鈥溶液,置1cm石英吸收池中,放入樣品光路,以恰當的掃描速度制作氧化鈥溶液的吸收圖譜并打印出峰值,與規矩值相比較。重復測定三次,取平均值,核算波長準確度與重復性。
用鈥玻璃校正片替代氧化鈥溶液,測定方法同上,其尖銳吸收峰主要有279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2和637.5nm,校正片運用前有必要通過校正。
基線平直度的檢測:
按儀器要求進行基線校正后,調度狹縫2nm,掃描速度中速,取樣間隔1nm,樣品和參比光路均為空氣。在儀器波長下限處加10nm,波長上限處減50nm規模內進行掃描,丈量圖譜中起始點的吸光度與圖譜中違反起始點Z多的吸光度(即Z大違反點)之差即為基線平直度。容許制作的基線在替換光源或濾光片時微有跳動,必要時可在檢定前再進行一次基線校正。
線噪聲和線噪聲的測定:
儀器設置為時間掃描方法,波長設置為250nm,狹縫1nm,樣品和參比光路均為空氣,調整透光率為,用恰當的掃描速度做時間掃描2分鐘,查詢線的改動,然后再將擋光塊刺進樣品光路,查詢0%線的改動2分鐘,讀出各自峰的Z大(谷)值的差,與規矩值比較。儀器設置時間掃描方法,波長置500nm,按上述方法測定500nm波長處的和0%線噪聲。如儀器無時間掃描方法,也可將儀器波長調至規矩處,用目視查詢2分鐘,讀出各自峰的Z大(谷)值的差。
吸光度準確度的檢測:
將儀器波長設置于400~200nm,狹縫1nm,先用配對的吸收池均裝入0.005mol/L硫酸空白溶液,用適宜的掃描速度記載基線或自動校正基線,然后再將樣品光路改動放0.006%重鉻酸鉀硫酸溶液0.005mol/L硫酸空白溶液,掃描并打印峰谷值,核算吸收系數,重復測定三次,取其平均值與規矩的吸收系數答應規模進行比較,應符合表中的規矩。